如何提高液相色譜柱柱效呢？

　　如何提高液相色譜柱柱效呢？
       以下介紹了幾種上流行的測(cè)量和計(jì)算柱效值的方法。
　　
　　1、提高液相色譜柱柱效的方法
　　
　　我們知道色譜峰的擴(kuò)寬與移動(dòng)相在熱力學(xué)的分配過程、移動(dòng)相和固定相中傳質(zhì)阻力
　　
　　所引起的不平衡有關(guān),譜峰擴(kuò)寬（非平衡）的程度是流速對(duì)傳質(zhì)速率的直接函數(shù)。要提
　　
　　高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。
　　
　　（1）降低移動(dòng)相的流速,但會(huì)使分析時(shí)間延長(zhǎng)。
　　
　　（2）減少固定相的量,但色譜柱中樣品的負(fù)載量也隨之減小。
　　
　　（3）減小固定相的顆粒度,但不能過分,過分后色譜柱的滲透率也會(huì)減小。
　　
　　（4）選用低粘度的移動(dòng)相,以利于快速傳質(zhì),但卻不利于多組份分析。
　　
　　（5）適當(dāng)提高柱溫,可降低移動(dòng)相的粘度,但柱效和分離度也隨之降低。
　　
　　（6）盡量減小停滯移動(dòng)相的體積,但卻加快了移動(dòng)相的流速。
　　
　　從以上介紹可看出,在色譜分析過程中,各種因素是互相和制約的。只有通過對(duì)
　　
　　柱效值的跟蹤測(cè)算,對(duì)自己分析方法不斷的研究和實(shí)踐,才能找到*的工作條件。
　　
　　2、對(duì)柱效值進(jìn)行跟蹤測(cè)算應(yīng)注意的問題
　　
　　我們也應(yīng)記住柱效值即塔板數(shù)只表示該色譜柱裝填的好壞,只用柱效值并不足以預(yù)測(cè)
　　
　　在所有條件下的柱性能,因?yàn)樵谶@些條件下,柱性能主要表示動(dòng)力學(xué)過程對(duì)色譜柱譜
　　
　　帶加寬的量。其他一些影響峰寬的因素,如柱外效應(yīng)和熱力學(xué)因素（通常表現(xiàn)為峰拖
　　
　　尾）,在理想情況下對(duì)于確定柱效值并不起重要作用。因?yàn)槿魏我粋€(gè)柱性能的定義都
　　
　　必然與用此色譜柱所做的分離相,所以依據(jù)一個(gè)單獨(dú)的數(shù)字來評(píng)定柱性能是不切
　　
　　實(shí)際的。對(duì)大多數(shù)色譜工作者來說,柱性能指的是色譜柱用于特定分離的能力,而僅
　　
　　僅有高柱效并不能保證這種分離能力。
　　
　　不管用什么特定的測(cè)試方法,都會(huì)有幾個(gè)參數(shù)影響柱效的測(cè)定。這些參數(shù)包括:洗脫
　　
　　液的成分和粘度及其線流速,測(cè)定塔板數(shù)所用的溶質(zhì),溫度,柱長(zhǎng),填料裝填方式,顆粒
　　
　　度,還有所選用的測(cè)量和計(jì)算方法。盡管大多數(shù)柱效測(cè)算沒有設(shè)法消除液相色譜儀器
　　
　　系統(tǒng)各部件對(duì)表觀峰寬的影響,但只要儀器是正常使用的,這些影響是次要的。而測(cè)
　　
　　量和計(jì)算方法對(duì)柱效值的確定起著極大的作用。
　　
　　3、幾種測(cè)量和計(jì)算柱效值的方法
　　
　　因?yàn)?a href="http://www.532m.cn">色譜峰是假定樣品濃度在移動(dòng)相和固定相中呈正態(tài)分布而得到的樣品譜帶分布,
　　
　　故常常把色譜峰型看作正態(tài)曲線來計(jì)算理論塔板數(shù)。因此計(jì)算柱效（以理論塔板數(shù)n
　　
　　為單位）的公式習(xí)慣上定義為:
　　
　　式中tR為色譜峰的保留時(shí)間;σ2是以時(shí)間為單位測(cè)量色譜峰的偏差;a是和峰高（從
　　
　　測(cè)峰寬的基線量起）有關(guān)的常數(shù),ωb是峰寬,表示由色譜峰頂點(diǎn)與色譜峰兩側(cè)拐點(diǎn)處
　　
　　做切線與峰底基線相交兩點(diǎn)間的距離。　　
　　4、結(jié)論
　　
　　假如一個(gè)色譜峰真是正態(tài)峰型,那么每種計(jì)算方法都會(huì)得到同樣的結(jié)果。然而即使一
　　
　　些比較理想的儀器和傾向于得到對(duì)稱峰型的溶質(zhì),由于柱內(nèi)的槽或空隙,也會(huì)出現(xiàn)非
　　
　　正態(tài)峰型。所以不同的計(jì)算方法將會(huì)得到相差較大的n值。通常偏離正態(tài)模型的峰型
　　
　　表示為“前延”或“拖尾”。對(duì)于這些峰型,越在峰的高處測(cè)量,計(jì)算的理論塔板數(shù)
　　
　　值就越大（準(zhǔn)確性越低）。在許多情況下,色譜工作者需要能反映整個(gè)峰型（包括拖尾）
　　
　　的柱效值,同時(shí)為了保證定量的重復(fù)性,也需要色譜峰很好的對(duì)稱性。這時(shí)對(duì)色譜峰
　　
　　非對(duì)稱性zui敏感的計(jì)算方法。如果目的
　　
　　僅僅是要監(jiān)測(cè)色譜柱從*次使用到使用壽命結(jié)束這一過程中的柱效,那么以上任何
　　
　　一種方法都可以,應(yīng)選擇zui簡(jiǎn)便的方法。