制備型液相色譜儀樣品的前處理事項

　　制備型液相色譜儀樣品的前處理事項
　　
　　制備型液相色譜儀安全注意事項
　　
　　1、流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器，使用對紫外吸收較低的溶劑配制。
　　
　　2、在流動相配制好后，一定要進行脫氣，除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止流動相中的微量氧與樣品發生作用。水相流動相需經常更換（一般不超過2天），防止長菌變質。
　　
　　3、如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相，應在實驗完畢柱子沖洗干凈，并保存于甲醇/乙腈中。
　　
　　制備型液相色譜儀樣品的前處理：
　　
　　制備型液相色譜儀色譜柱分離的樣品多，比分析型液相色譜柱更容易受污染，樣品前處理非常必要。
　　
　　三氟乙酸（TFA）在緩沖液中的作用：
　　
　　1、TFA起到類似離子對的作用，一般濃度在0.05%～0.1%。濃度過高會使溶液偏酸，長時間使用可能影響色譜柱壽命。
　　
　　2、TFA可抑制硅膠表面的硅醇基，改善堿性化合物的峰形。若0.1%TFA分離不好，可加大濃度到0.2%，但用完后要及時沖洗色譜柱。
　　
　　3、走梯度時走成基線漂移，但對制備影響不大。
　　
　　制備型液相色譜儀降低柱壓的方法：
　　
　　采用1%乙酸水溶液和甲醇二元梯度。
　　
　　制備型液相色譜儀提高檢測下限的方法：
　　
　　1、如果是等度洗脫，一定要改成單元等度。
　　
　　2、盡量采用乙腈－水系統洗脫。乙腈紫外吸收小，相同條件下噪音小。
　　
　　制備型液相色譜儀用水要求：
　　
　　不含金屬離子和細菌。
　　
　　制備型液相色譜儀分析方法開發中流動相的調整原則：
　　
　　1、由強到弱：
　　
　　一般先用90%的乙腈或甲醇－水或緩沖溶液進行試驗，可很快得到分離結果，然后根據出峰情況調整有機溶劑（乙腈或甲醇）的比例。
　　
　　2、三倍規則：
　　
　　每減少10%的有機溶劑（乙腈或甲醇）的量，保留因子增加約3倍，此為三倍規則。調整時注意觀察各個峰的分離情況。
　　
　　3、粗調轉微調：
　　
　　當分離達到一定程度時，應將有機溶劑（乙腈或甲醇）10%的改變量調整為5%，并據此規則逐漸降低調整率，直至各組分的分離情況不再改變。